ω-3多不孢和脂肪酸治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的基础与临床研究

第一部分ω-3多不饱和脂肪酸对小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的预防作用
　　 目的：ω-3多不饱和脂肪酸(omega3 polyunsattlrated fatty acids，ω3-PUFA)具有调节脂代谢的作用。脂肪肝是代谢综合征的病理表现之一。本研究旨在探讨ω-3多不饱和脂肪酸对小鼠非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的预防作用，为临床治疗非酒精性脂肪性肝病患者提供理论依据。
　　 方法：取9-10周龄雄性C57BL小鼠30只，饲养72小时后，随机分为模型组、治疗组及正常对照组，每组10只。正常对照组喂普通饲料，模型组喂Liber-Decarli高脂液体饲料(脂肪71％，蛋白质18%，糖类11%)，治疗组除喂高脂饲料，并用海狗油ω-3多不饱和脂肪酸0.3ml每日灌胃。6周后全部采摘眼球取血，并留取肝脏组织标本。用生化分析法检测血脂。免疫组织化学染色法测定脂联素、CYP2E1、PPAR-α(SP法)在肝脏的表达情况，苏木素-伊红(HE)、苏丹Ⅲ染色法观察肝脏的脂肪变性程度。
　　 结果：1．脂肪变性程度：正常组肝细胞未见脂肪变性。模型组光镜下普遍脂肪变性，布满脂肪空泡。治疗组与模型组相比，脂肪变性程度明显减轻（P＜0.05）。
　　 2．生化指标比较：模型组血清TG(mmol/l)、TC(mmol/l)分别为1.38±0.40、4.79±0.71，较正常组(0.55±0.12、2.34±0.44)显著升高，治疗组TG、TC分别为0.5±0.12、2.75±0.47，较模型组显著下降(P＜0.05）。肝脏TG和TC(mmol/l):模型组TG、TC分别为260.19±90.78、123.7±32.15，较正常组(70.63±19.67、54.27±33.55)显著升高（P＜0.01），治疗组TG、TC分别为103.58±33.28、52.17±20.24较模型组均明显降低（P＜0.05）。
　　 3.细胞因子的比较：(1)肝脏脂联素(mmol/l):模型组为7.27±3.45较正常组(21.68±2.3)显著下降(P＜0.01)，治疗组为12.14±0.83较模型组明显升高（P＜0.05）。(2)CYP2E1和PPAR-α:免疫组化示模型组CYP2E1表达增高，治疗组表达明显减少(P＜0.05）；模型组PPAR-α表达明显减少，治疗组明显增高(P＜0.05)。
　　 第二部分ω-3多不饱和脂肪酸治疗非酒精性脂肪性肝病的临床研究
　　 目的：临床验证海狗油ω-3多不饱和脂肪酸对非酒精性脂肪性肝病的疗效和安全性。
　　 方法：采用随机、双盲、双模拟对照方法，选择非酒精性脂肪性肝病患者40例，随机分为治疗组和对照组组：每组各20例。治疗组和对照组分别给予海狗油ω3-PUFA胶丸和橄榄油模拟胶丸，每日4.0g，分二次口服，疗程为6个月。检测治疗前和治疗疗程结束后肝生化(ALT、AST、GGT)、血脂(TC、TG、HDL、LDL)、肝/脾CT值比值的变化；以及治疗前后患者临床症状体征和BMI变化。同时观察治疗期间患者的不良反应及血常规（包括红细胞计数、血红蛋白、白细胞计数、血小板计数）、尿常规、心电图、BUN、Cr、尿酸、胆红素等变化，以评价其安全性。
　　 结果：1．两组患者间的可比性：各组患者的一般资料如性别、年龄、BMI等进行比较，同时进行治疗前两组间生化指标血脂：(TC、TG、HDL、LDL);肝生化：(ALT、AST、GGT)和肝/脾CT值比较，两组间各项指标均无显著性差异，（P＞0.05）,确定两组间具有可比性。
　　 2．治疗前后生化指标的变化：治疗组血清TG、ALT、GGT较对照组均显著下降(t=2.592，2.394，3.065;p＜0.05)，治疗前后血清TC、AST、LDL及HDL水平与对照组相似(t=1.669，0.792，1.527，-1.174，p＞0.05)。
　　 3．治疗前后肝/脾CT值比值的变化：治疗组治疗后肝/脾CT值比值显著上升。治疗前后肝/脾CT值比值两组间比较有显著性差异(p＜0.05)。
　　 结论：1.ω3-多不饱和脂肪酸通过对脂联素、CYP2E1等细胞因子的干预作用以减轻肝脏脂肪变性，从而达到对非酒精性脂肪性肝病的治疗作用。
　　 2.ω3-多不饱和脂肪酸能减轻肝脏脂肪浸润、调节血脂、改善肝功能。