血清肿瘤标志物AFP、CK19、PEG10和IQGAP1在肝癌中表达的研究

背景:肝细胞癌(HCC)是常见的肿瘤，目前发病率居世界第5位，死亡率居第3位，肝癌的发病率随着年龄的增长而增加。但在肝癌发病率高的国家，被诊断为肝癌的甚至在20岁以下，且男性的发病率更频繁。肝癌起病隐匿、发展迅速、死亡率较高、严重威胁人们的生命健康。肝癌的发生是多因素、多途径、多阶段、长时间作用的结果。导致肝癌发生的危险因素主要是肝硬化，还包括病毒感染(如:HBV、HCV)、过量饮酒、吸烟、摄入黄曲霉毒素B1、氯乙烯、糖尿病和遗传疾病（如血色素沉着症和α1-抗胰蛋白酶缺陷病），研究发现重叠的因素显著提升肝癌的风险。
　　目前亚临床型肝癌是肝癌治疗的最佳阶段。亚临床型的肝癌是指无临床症状和体征的肝癌，多为高危人群在体检时发现。人类根治肝癌寄希望于肝癌的早期诊断和治疗，目前治疗肝癌的首选方法为外科手术切除，也可以使用综合性治疗的方法包括微波消融、TACE、射频消融、放疗、肝移植及生物疗法等。假如肝癌能早期诊断，则可早期治疗并取得较好的效果，提高肝癌患者的5年生存率。如今诊断HCC的主要方法包括影像学检查、实验室和病理学检查。目前病理学检查是诊断肝癌最准确的方法，但必须经过手术或是穿刺获得病变组织，这个方法往往不能被大部分的患者所接受。血清中肿瘤标志物的检测，因为其具有特异性高、敏感性高、痛苦少等特点，越来越受到人们的关注，AFP是特异性的肝癌细胞高表达蛋白质，是第一个检测和临床跟踪肝癌患者的血清肿瘤标志物。由于AFP在肝炎、肝硬化等疾病中也有升高，且有一定的假阳性率，目前尚无任何肿瘤标志物可完全诊断肝癌，所以可通过联合检测以提高肝癌的早期诊断率，因此发现新的血清肿瘤标志物意义重大。
　　目的:检测血清肿瘤标志物AFP(a-FetoProtein)、PEG10(Paternallyexpressedgene10)、IQGAP1(IQmotifcontainingGTPaseactivatingproteins1)、CK19(cytokeratin19)在肝癌、肝硬化和健康人血清中的水平，探讨上述四项肿瘤标志物的单独血清检验及联合检验对HCC患者的临床诊断价值，分析CK19、PEG10、IQGAP1对AFP阴性的肝癌的诊断价值。希望能够提高HCC诊断率及发现新的理想的血清肿瘤标志物。
　　材料与方法:采集来自河南省人民医院2012年12月至2013年11月期间住院患者的血清标本156例，作为研究对象，年龄为32-81岁，平均58±11.5岁。包括肝癌组96例，健康人组30例，肝硬化组30例，所有研究对象的血清离心后储存于-100℃的冰箱内，统一进行检测，用ELISA法（酶联免疫吸附法）检测各组AFP、CK19、PEG10、IQGAP1的表达情况，应用方差检验的方法对数据进行分组比较分析。AFP、CK19、PEG10、IQGAP1诊断肝癌的最佳临界值，用受试者工作特征曲线(ROC)。分析过程使用SPSS17.0软件。
　　结果:
　　1、三组患者血清中AFP、CK19、PEG10、IQGAP1在肝癌组的表达显著高于肝硬化组和健康组，差异有统计意义(p＜0.05)。
　　2、血清肿瘤标志物AFP、CK19、PEG10、IQGAP1诊断肝癌的敏感度分别为85.4％、42.9％、72.7％、78.6％。特异度分别为80.0％、87.2％、86.9％、83.3％。
　　3、采用AFP与CK19、PEG10、IQGAP1分别行平行联合检测方法，可以明显提高诊断HCC的敏感度，采用AFP与CK19、PEG10、IQGAP1分别行系列联合检测方法，可以提高了诊断HCC的特异度。
　　4、血清肿瘤标志物CK19、PEG10、IQGAP1在AFP阴性的肝癌的水平经方差比较分析，CK19在AFP阴性的肝癌组中的水平明显高于肝硬化组，差异有统计意义(p＜0.05);PEG10、IQGAP1在AFP阴性的肝癌组与肝硬化组的水平，差异无统计意义(p＞0.05)。
　　5、CK19对AFP阴性的肝癌诊断的准确度最高，敏感度为50％，特异度为90.9％。
　　结论:
　　1、原发性肝细胞癌组的血清AFP、CK19、PEG10、IQGAP1水平均高于肝硬化组及健康对照组。
　　2、PEG10、IQGAP1可成为诊断肝癌的血清标志物，CK19的敏感度较低，尚不能单独用于诊断肝癌。CK19、PEG10、IQGAP1与AFP的联合检测增加了诊断肝癌的敏感度及特异度。
　　3、CK19对AFP阴性的肝癌诊断的准确度最高，在肝癌的早期诊断中可能作为AFP有价值的补充。