Fas及FasL基因多态性与食管癌和胃癌的易感性

研究背景：
　　 食管癌是常见的消化道恶性肿瘤，其发病率具有显著的地域性和种族差异。我国是食管癌高发地区，也是食管癌病死率最高的国家之一。目前，食管癌的病因及发病机制尚未完全明确，某些理化因素的长期刺激和食物中致癌物质是食管癌的重要病因，同时遗传因素也参与本病的发生。食管癌的发病有明显的家族聚集现象，在某些癌症高发家族中，存在大量食管癌相关基因的变化。胃癌是我国第二常见肿瘤，发病率居消化道恶性肿瘤的第一位。但其病因及发病机制亦尚未完全明确。研究表明，环境因素、感染因素及遗传因素在胃癌的发病过程中起着重要作用。胃癌的发病亦有家族聚集倾向，患者家属胃癌发病率高于一般人2-4倍。因此，癌症遗传学研究成为探索导致肿瘤细胞选择性优势生长的分子生物学机制的重要手段，尤其是影响免疫系统、DNA修复、炎症反应、某些蛋白(包括酶)表达和功能的基因的研究。近些年来，关于肿瘤遗传易感性的研究越来越成为研究热点。
　　 遗传易感性是指具有易患某种疾病的“遗传素质”，在一定环境因素作用下，机体才发生相应的疾病，即基于遗传物质基础上的对疾病罹患的敏感性。目前，遗传易感性的研究热点是基因多态性。基因多态性是人类基因组中同一位置的基因或DNA序列具有不同类型。单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism，SNP)，特指由单个核苷酸变异引起的DNA序列的多态性。携带某些SNP的个体在某些特定的环境因素作用下，可影响基因在某些特殊环境下功能的发挥，从而表现出对疾病的易感性。
　　 人类Fas分子位于10号染色体q24.1区，cDNA长度为2534bP，其编码产物为319个氨基酸残基、分子量为43KD的I型跨膜糖蛋白。Fas配体(Fas ligand，FasL)基因位于人类染色体1q23，基因长度约8Kb，其编码码产物为281个氨基酸残基、分子量约40KD的Ⅱ型跨膜蛋白。Fas及FasL在细胞凋亡过程中发挥重要作用。Fas表达下调和(或)FasL表达上调有利于肿瘤的发生和发展。Fas及FasL基因启动子区的基因多态性可影响基因的转录活性，从而影响蛋白的表达。已经发现Fas启动子区存在2个单核苷酸多态位点：Fas-670A/G和Fas-1377G/A。Fas-670G和Fas-1377A等位基因分别破坏STAT1和Sp1转录因子结合部位，从而降低启动子活性，使Fas基因表达下降。FasL启动子区亦存在单核苷酸多态位点：FasL-844T/C。FasL-844T/C位于 CAAT/增强子结合蛋白(CAAT/enhancer-binding proteinβ，C/EBPβ)转录因子结合基序。FasL-844C等位基因可产生更高水平的FasL表达。据报道，Fas-670A/G、Fas-1377G/A、FasL-844T/C基因多态性与某些肿瘤的发病风险增加有关。
　　 目的：
　　 本研究采用病例-对照研究，确定Fas-670、Fas-1377及FasL-844各基因型在病例组和对照组的分布，探讨Fas及FasL基因多态性与河南安阳地区食管癌和华北地区胃癌易感性的关联。
　　 方法：
　　 食管癌研究对象为河南安阳地区204例食管癌患者及相同地区248例健康献血者，胃癌研究对象为北京、山东两地区234例胃癌患者及相同地区321例健康献血者。提取上述人群外周血基因组DNA，用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)确定Fas-670、Fas-1377及FasL-844基因型。以Mann-Whitney检验比较病例组与对照组间年龄分布，以卡方检验(x2-test)分析两组间性别、吸烟、饮酒的分布差异，以Hardy-Weinberg平衡检验确认研究样本的群体代表性，计算各组的基因型频率及等位基因频率。采用非条件Logistic回归模型，在校正混杂因素后，计算比值比(OR值)及95％可信区间(95％ CI)，评价各基因型与食管癌和胃癌易感性之间的关系。
　　 结果：
　　 第一部分：病例组和对照组在年龄、性别、吸烟和饮酒状况的分布差异无统计学意义(P>0.05)。在所研究人群中，Fas-670、Fas-1377及FasL-844均具有多态性，且基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。Fas-670、Fas-1377及FasL-844各基因型在病例组和对照组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析表明，Fas-670、Fas-1377及FasL-844基因多态性与食管癌发生风险无关。在食管癌易感性分析中，分别根据年龄、性别、吸烟、饮酒等因素进行分层分析。结果显示Fas-670、Fas-1377及FasL-844基因多态性与食管癌发生风险仍无关联。
　　 第二部分：病例组和对照组在年龄、性别、吸烟和饮酒状况的分布差异无统计学意义(P>0.05)。在所研究人群中，Fas-670、Fas-1377及FasL-844均具有多态性，且基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。Fas-670、Fas-1377及FasL-844各基因型在病例组和对照组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析表明，Fas-670、Fas-1377及FasL-844基因多态性与胃癌发生风险无关。在胃癌易感性分析中，分别根据年龄、性别、吸烟、饮酒等因素进行分层分析。吸烟人群中，相对于携带Fas-670AA基因型而言，携带Fas-670GA基因型可增加患胃癌的风险(OR2.438，95％ CI=1.067-5.569)；携带Fas-1377GA基因型者患胃癌风险是携带Fas-1377GG基因型者的2.175倍。
　　 结论：
　　 1.在所研究人群中，Fas-670、Fas-1377及FasL-844均具有多态性。
　　 2.Fas-670、Fas-1377及FasL-844基因多态性与河南安阳地区食管癌发生风险无相关性。
　　 3.FasL-844基因多态性与华北地区胃癌发生风险无相关性。Fas-670GA、Fas-1377GA基因型可增加这一地区吸烟者患胃癌的风险。