园艺植物几种病毒病的分子检测与鉴定

近几年，随着蔬菜种植面积不断扩大和栽培方式的不断更新，病毒病发生日趋严重，多呈现混合性侵染，已成为制约作物产量和品质的主要因素。番茄黄化曲叶病毒（Tomatoyellow leaf curl virus，TYLCV），引起番茄黄化曲叶病，是蔬菜生产上的一种毁灭性病害。黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaicvirus，CGMMV）是烟草花叶病毒属危害葫芦科植物的重要病毒之一，一旦发生往往会使受侵染作物绝产，给葫芦科作物的生产造成严重威胁。本研究主要以这2种病毒为对象，以PCR技术为基础，对山东省、吉林省和辽宁省番茄主产区的番茄及山东省番茄种苗进行检测，对山东省葫芦科主产区的葫芦科作物进行检测，目的是摸清这2种病毒的发生分布情况和寄主范围，并对来源不同的分离物进行系统发育分析。主要结论如下：
　　⑴对山东省5家主要种苗公司833株种苗TYLCV带毒情况检测，种苗带毒率为0.12％。
　　⑵基本摸清了TYLCV病毒在山东省、吉林省和辽宁省主产区的发生分布情况，从3个省共采集到359份番茄样品，筛选出206株阳性样品，获得45条TYLCV全序列;
　　⑶初步确定TYLCV寄主范围，从3个省共采集到12科32种非番茄植物样品，最后在百日草、棉花、烟草、长豇豆、茼麻、铁苋菜、苏子等7种寄主中检测到TYLCV，除铁苋菜外，其余6种也是世界范围内首次发现的TYLCV新寄主。获得的7条TYLCV新寄主分离物的核苷酸序列与GenBank上TYLCV参考序列的一致性在92.0％-99.8％之间且均为以色列株系。
　　⑷基本摸清了CGMMV病毒在山东省的发生分布情况，从山东省4个县级市12乡镇共采集到324份葫芦科样品，其中142份样品带有CGMMV，带毒率为43.8％。获得CGMMV黄瓜、丝瓜、甜瓜分离物全序列，其中丝瓜、甜瓜分离物全序列是首次获得，并且丝瓜是世界范围内首次发现的新寄主。CGMMV的全序列分析表明:CGMMV的系统进化关系与分离寄主无明显关系，而与分离地域有一定的相关性。
　　⑸目前侵染肥城桃的主要病毒或类病毒种类有:桃潜隐花叶类病毒(Peach latentmosaic viroid，PLMVd)、啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid，HSVd)、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)。