SD大鼠胫骨慢性骨髓炎动物模型的构建及效果评价

目的:用简易的方法构建一个稳定可复制的SD大鼠胫骨慢性骨髓炎动物模型。
　　方法:30只SD大鼠随机分为实验组(n=20)与对照组(n=10)两组。3％戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉后，右后腿备皮，碘酒消毒，铺无菌巾，胫骨近侧干骺端内下方切0.5cm纵行切口，显露内侧骨皮质，在胫骨结节内下0.5cm处钻一小孔。往实验组大鼠右胫骨骨髓腔内注入0.1ml5％鱼肝油酸钠和0.1ml2×108/ml菌落形成单位(CFU)的标准金黄色葡萄球菌(ATCC25934)悬液;往对照组(n=10)大鼠的右胫骨髓腔内注入0.1ml5％鱼肝油酸钠和0.1ml生理盐水。观察术后一周和三周大鼠体重、病灶大体感染情况、造模胫骨X线表现;对所拍X线片由放射科医师独立进行Norden评分。术后第一周从实验组和对照组分别随机抽取5只SD大鼠，过量麻醉处死后，取造模灶周围软组织做细菌培养，取右胫骨标本做组织病理学切片H&E染色分析。术后第三周，过量麻醉处死所有大鼠，取造模灶周围软组织做细菌培养，取右胫骨标本做组织病理学切片H&E染色分析。用IBM SPSS19版本软件进行统计学分析。多次重复测量采用重复测定方差分析的统计学方法;术后第一周、术后第三周实验组与对照组右胫骨X线Norden评分比较用非参数检验两独立样本Mann-Whitney U检验法的统计学方法。实验组和对照组术后第一周与术后第三周X线Norden评分比较用非参数检验Wilcomxon配对符秩检验。
　　结果:术后第一周:实验组大鼠体重比对照组大鼠体重轻，差异有统计学意义。实验组所有动物在手术区域大体感染情况明显，手术切口未愈合，对照组手术切口基本愈合。实验组动物右胫骨的X线摄片可见明显的骨髓内高亮度影，有些可见骨膜反应，未见明显的骨缺损和死骨形成，Norden评分平均分1.15±0.587;对照组大鼠右胫骨X线片结果与正常侧胫骨X线表现基本无异，Norden评分平均分为0.30±0.483;实验组大鼠右胫骨X线片Norden评分明显高于对照组大鼠右胫骨X线Norden评分，差异具有统计学意义。随机抽取实验组5只大鼠的胫骨标本组织病理学切片H&E染色光镜下可见视野中大量炎症细胞浸润、骨膜增生;对照组的胫骨标本病理切片视野中偶可见炎症细胞。实验组5只大鼠的造模病灶周围软组织标本细菌培养全为阳性;对照组全为阴性。术后第三周:实验组大鼠体重与对照组大鼠无明显差异。实验组所有动物在手术区域大体感染情况明显趋于慢性，4只大鼠病灶出现窦道，其余皮肤手术切口基本愈合，但大部分呈现明显色素沉着;对照组动物手术切口完全愈合，手术区域与正常组织基本无异。实验组大鼠右胫骨X线片大多数可见严重的骨膜反应、新骨形成、骨质破坏和死骨形成，有些可见骨干畸形，Norden评分平均分为2.67±0.617;对照组X线片与正常侧无异，Norden评分平均分为0;实验组大鼠右胫骨X线片Norden评分明显高于对照组大鼠右胫骨X线Norden评分，差异具有统计学意义。实验组右胫骨标本组织病理学切片H&E染色光镜下可见大量炎症细胞浸润、严重骨细胞破坏、骨膜增生;对照组骨组织病理学切片可见排列紧密、有秩序的骨细胞排列。实验组所有大鼠的造模病灶周围软组织标本细菌培养全为阳性，对照组全为阴性。术后第三周实验组大鼠的右胫骨X线Norden评分明显高于第一周实验组大鼠的右胫骨X线Norden评分，差异有统计学意义。
　　结论:该造模方法稳定可行，可在往SD大鼠胫骨近侧干骺端髓腔内注入0.1ml5％鱼肝油酸钠和0.1ml2×108CFU/mL金黄色葡萄球菌后的第三周时成功造出SD大鼠胫骨慢性骨髓炎动物模型。