芒萁黄酮的纯化分离及抗氧化活性研究

芒萁是一种药用蕨类植物，具有很强的生理活性，且其分布广泛、资源丰富。黄酮类化合物是芒其中的主要活性成分之一，本论文深入研究芒萁黄酮的提取工艺、纯化、分离、抗氧化能力，为全面开发芒萁提供理论依据。
　　 采用四元三次正交设计研究了超声波协同微波对芒萁黄酮的提取工艺。结果表明，先经过超声处理后，再运用微波破壁，芒萁黄酮的提取率可到达14.47％。其最佳工艺条件为:料液比1∶50，超声功率500W超声处理6min后，再在微波功率700W，微波压强0.3Mpa的条件下，微波处理2min。相比之下，超声波-微波联合提取法辅助提取芒萁黄酮，比单一微波辅助提取法的最大提取率高出9％，比单一的超声波辅助提取法的最大提取率高出15％，比单纯热水浸提法的最高提取率高出35％。
　　 对芒萁黄酮进行了纯化、分离，用95％的酒精提取芒萁黄酮，依次用乙醚-丙酮混合溶液、石油醚除杂，再经大孔树脂纯化后，依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取分离，并对乙酸乙酯层用凝胶柱层析法与硅胶柱层析法进一步分离。结果表明，纯化后，芒萁总黄酮纯度可由33.16％提高到49.48％，各萃取层中，正丁醇层含量最大，占60.44％，其次是乙酸乙酯层，占21.01％，氯仿层含量最小，仅占1.63％。而各萃取层黄酮纯度大小依次为乙酸乙酯萃取物75.42％、正丁醇萃取物55.17％、氯仿萃取物19.04％，说明芒萁黄酮大部分集中在乙酸乙酯层和正丁醇层中。对乙酸乙酯相分离后得到7个主要组分SU-(1-7)，其中质量分数最大的是SU-1，占81.67％，且其黄酮纯度最高，达77.01％。
　　 通过分析对自由基的清除作用，研究了芒萁黄酮的抗氧化活性。结果表明，纯化后芒萁总黄酮的抗氧化活性明显强于纯化前，说明主要起抗氧化作用的物质是芒萁黄酮;各萃取层中抗氧化活性最好的是乙酸乙酯层，特别指出其对·OH清除能力明显优于Vc。其IC50值低于0.1mg/mL，且在浓度为0.4mg/mL时清除率达到94.55％。乙酸乙酯相分离得到的七个主要组分中，组分SU-1的抗氧化活性最好，当浓度为0.2mg/mL时，其对超氧阴离子的清除率为82.93％。