金钱树(Zamioculaszamiifolia Rehd.)、豆瓣绿(Peperomia obtusifolia)、观音莲(Sempervivum tectorum)和白花小松(Villadia batesii)均为多年生常绿草本植物,适用于室内观赏,观赏价值独特,是新型观叶植物佳品,其组培再生体系的建立对工厂化生产和育种均具有重要意义。本研究以金钱树和豆瓣绿的叶片、观音莲和白花小松茎的尖为外植体,针对其消毒程序、接种方式、激素浓度等方面进行了探索研究。本研究以该四种的优质观叶植物为材料,构建了建立高效简洁的组培再生体系,为新优观叶植物的工厂化生产和品种改良及育种工作打下基础,为进一步的基因工程改良提供基础材料。
主要结果如下:
(1)不同外植体最佳消毒程序
外植体的适宜消毒程序:先用自来水冲洗30 min,洗洁精浸泡30 min,流水冲洗10min,将材料置于超净工作台上,先用70%酒精表面消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液处理。金钱树、观音莲和白花小松最佳处理时间为20 min,豆瓣绿则为15min。
(2)金钱树组培再生体系
金钱树叶片在Z2培养基上(MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1),叶片切口处形成愈伤组织并有不定芽的发生,可以直接形成完整植株。
(3)豆瓣绿组培再生体系
豆瓣绿在P3(MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.15 mg·L-1)上即可获得完整植株。豆瓣绿再生能力强,且繁殖系数高,其根系为毛状根,根系极易发生。
(4)观音莲组培再生体系
观音莲采用茎尖诱导丛生芽,丛生芽发生于叶腋处。在S8(MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.15 mg·L-1)培养基上增殖效果最佳,丛生芽芽体较小需要壮苗培养。芽体仅在S14(MS+IBA0.3 mg·L-1)培养基有根系发生。
(5)白花小松组培再生体系
白花小松采用茎尖诱导丛生芽,丛生芽发生于叶腋处,在V6(MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA1.0 mg·L-1)上丛生芽数量最多;最佳生根培养基为V7,即MS无激素培养基。