高脂条件下吉富罗非鱼脂肪肝病的模型建立及垂盆草药效作用的研究

鱼类脂肪肝病使罗非鱼容易遭受外源致病因子导致感染而大规模死亡，给养殖者造成极大的经济损失，阻碍了罗非鱼养殖业的发展。本实验通过投喂高脂饲料建立罗非鱼非酒精脂肪肝模型为基础，进行了垂盆草对该类模型罗非鱼保肝药效作用的研究及对肝细胞和肾细胞细胞凋亡抑制作用的探讨，为垂盆草在预防高脂投喂导致的脂肪肝病提供了实验依据。根据前期研究，将实验用的罗非鱼平均分为3个组，每组设3个平行组。分别为正常组、高脂组、垂盆草组。每日的9:00am和5:00pm，进行连续6周的投喂。3个组的罗非鱼在投喂6周后随机抽取每组15尾，采集血清、观察脏器官的变化并采集肝胰脏组织样本，检测6周后实验罗非鱼脏器官损伤程度的主要生理生化指标，利用H.E染色技术观察肝脏细胞的变化情况，判断垂盆草针对以高脂饲料为基础投喂罗非鱼所致脂肪肝病的预防效果。采用TUNEL检测方法对石蜡包埋过的三组罗非鱼肝脏和肾脏切片通过荧光显微镜观察细胞变化情况，通过计算得出凋亡率并作比较。所得结果如下:经过6周的喂养，高脂组罗非鱼与基础组相比，从血液指标的测定上来看:高脂组提高了罗非鱼血清中的AST、ALT、TG、CHOL、LDH、TBA以及MDA水平(P＜0.05），同时提高了CAT、SOD、T-AOC以及GLOB、ALP免疫指标的含量(P＜0.05);而降低了ALB的含量。从肝胰脏指标的测定上来看:高脂组罗非鱼提高了罗非鱼肝胰脏中转氨酶活性、MDA含量以及肝胰脏和肠道中消化酶水平(P＜0.05），也提高了抗氧化指标CAT、SOD含量(P＜0.05）;从肝脏和肾脏细胞凋亡检测可知:高脂组罗非鱼不论是肝细胞还是肾细胞，凋亡率上均显著高于基础组(P＜0.05）。实验6周期间相对高脂组罗非鱼，从血液指标的测定上得出:垂盆草组显著降低了实验罗非鱼血清中的AST和ALT水平(P＜0.05），并抑制了高脂饲料造成血清TG、CHOL、LDH和TBA水平的升高(P＜0.05），对于抗氧化指标和免疫指标测定存在显著差异(P＜0.05）;从肝胰脏指标的测定上得出:降低了罗非鱼肝胰脏中转氨酶活性以及MDA含量(P＜0.05），并提高了CAT、SOD、T-AOC水平(P＜0.05）;从肝脏和肾脏细胞凋亡检测可得:垂盆草组罗非鱼不论是肝细胞还是肾细胞，凋亡率上均显著低于高脂组(P＜0.05)。然而垂盆草组各项指标与基础组相比基本没有显著差异(P＞0.05）。通过本实验可知，基础组与高脂组所测得的结果趋同，普遍显著高于高脂组，说明了往饲料中添加垂盆草能预防吉富罗非鱼脂肪肝病，且药效作用显著。体现在减轻了吉富罗非鱼肝胰脏组织的损伤、促进组织修复、降低了血脂浓度以及提高了机体的抗氧化能力，同时降低了肝脏和肾脏的细胞凋亡率。