食管鳞癌组织中抑癌基因crnn的表达及其临床意义

研究背景和目的
　　食管癌是全世界最具有侵袭性的恶性肿瘤之一，据统计是癌症所致死亡率的第六位，食管癌的主要病理类型是鳞状细胞癌，在中国的发病率比较高，尤其是中国的北部为发病的高危地区，平均十万人中有21人发病，比其他低发病率的国家要高20倍之多。河南省林州市及其比邻的辉县、安阳等地区是中国，也是世界上发病率和死亡率最高的地区，目前食管癌仍是该地区居民肿瘤相关死亡的主要原因，其中男性年发病率分别高达161/10万，女性发病率高达103/10万，是影响人民的生活质量和健康的非常严重的因素。流行病学研究显示，某些环境危险因素，包括吸烟和酗酒史、营养缺乏、吃热食、摄入致癌物都和ESCC有关。在中国的这些高危区域内，研究显示有明显的家族聚集性，说明遗传易感性和环境因素可能与该疾病的病因学有关。在过去的几十年里，随着医疗水平的不断进步，食管癌的诊疗方面都取得了极大的进步，但是患者的预后及生存率仍然很差。迄今为止，食管癌发生的分子生物学方面的机制仍尚不清楚，所以，为了研究食管癌发生相关的基因，提高食管癌的早起诊断率和治疗效果，更好地了解肿瘤的发生机理，寻找肿瘤患者的生物标记，从而做到肿瘤的早期诊断、早期治疗及指导用药等都具有特别重要的意义。
　　为了研究与食管癌的发生及进展有密切关系的分子生物学因子，我们在导师的联系下，到河南省林州市人民医院收集了手术切除的100例食管癌组织及相应的癌旁正常黏膜组织的石蜡包埋组织样本，患者的手术时间为2002年到2005年，所有标本经组织病理学检查证实为原发性食管鳞状细胞癌，患者手术前均未接受任何治疗，包括放疗和化疗。建立了包括临床病例资料及预后情况的组织芯片。通过免疫组织化学染色发现，crnn在食管癌组织中的表达明显低于其对应的癌旁相对正常组织中的表达。
　　研究方法
　　1、临床标本的收集
　　在河南省林州市人民医院收集了100例手术切除的食管癌组织及其癌旁相对正常的组织，所有的样本都经过常规的甲醛固定、石蜡包埋、切片和HE染色，病理诊断为食管鳞状细胞癌，癌旁正常组织中无肿瘤细胞。所有患者术前均未接受过放疗和化疗及免疫治疗。
　　2、研究方法
　　收集病理切片和HE染色，然后在的病理切片上根据形态学特点确定好具有代表性的肿瘤部位，用组织阵列仪支架上的X、Y轴刻度尺定位后，用穿刺取样针在供体蜡块相应的位置进行穿刺取样。预先制备一个45×20mm大小的受体蜡块，用组织阵列仪（广州浩翰仪器有限公司生产）穿刺取样针打出间距为1.8mm，直径为1mm，深度为3-4mm的孔。然后，将用组织阵列仪穿刺所得的微小圆柱形组织挤压到接受蜡块上已制备好的阵列孔中，制作好组织芯片。使用标准的生物素-亲和素-过氧化物酶复合物方法进行免疫组化操作，检测CRNN蛋白在食管癌组织及癌旁正常组织中的表达及是否有差异。
　　研究结果
　　通过免疫组化所显示的蛋白的表达情况表明，crnn在在食管癌组织中的表达率相对于癌旁相对正常组织的表达率有所降低，且与相对应的癌旁正常组织相比，食管癌组织存在较高频率的表达下调或缺失。通过与患者的临床病例资料对比，发现出现crnn表达下调或缺失与临床TNM分期及淋巴结转移相关。
　　而且通过观察食管癌患者的五年生存率发现，crnn基因表达下调或缺失的食管癌患者的生存率与crnn基因正常表达的食管癌患者相比，生存率有明显的下降。说明crnn基因的表达与患者的预后相关。
　　结论
　　综上所述，我们认为crnn基因表达的下调参与了食管鳞状细胞癌的发生、发展及预后，crnn基因表达的下调可能与食管鳞癌的淋巴结转移、临床分期及生存时间有关，crnn基因表达下调与否的检测对食管鳞癌的临床诊断具有一定的价值，同时可以做为判断患者预后的指标之一。