丹参注射液对SD大鼠非压迫腰椎间盘退变的实验研究

目的:通过硬膜外注射制备好的退变椎间盘髓核混悬液来构建非压迫腰椎间盘突出模型,来为临床试验研究提供一种较简便的试验模型。用丹参注射液治疗SD大鼠非压迫腰椎间盘退变的实验室研究,为在临床用中药化淤止痛治法治疗腰腿痛提供理论依据。通过丹参注射液的疗效为中药制剂治疗和预防腰椎间盘退变等疾病提供理论依据,为临床进一步应用丹参等中药提取物防治本病提供实验依据,为腰椎间盘退变中药的筛选提供新的研究思路及方法。通过丹参注射液对假膜组和实验组的临床观察和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)结果的比较,来研究引起退变椎间盘疼痛的根源。
　　方法:采用健康成年的96只SD大鼠随机分成4组。正常组:24个,对照组24只,假模组24只、实验组24只,建立非压迫性腰椎间盘退变的模型,正常组不予处理,其余各组均使用医用绷带在生理弯曲范围内将鼠尾折成―U‖型,每日早晚2次,每次1-2小时。1个月后,每隔7天分批从正常组、对照组模型中各选取4只,氯胺酮常规麻醉、选距鼠尾根部1cm处作为断点,术区消毒、铺无菌洞巾,切断鼠尾并缝合伤口,注射抗生素抗感染。把鼠尾的皮肤及周围粘连的韧带等多余组织清除掉,用生理盐水予以冲洗干净,用中性福尔马林固定液来中浸泡固定成标本,放冰箱中冷藏保存24 h后,用手术刀片切开准备取的椎间盘,每条尾巴选取3个椎间盘组织已备切片。然后,把取出的椎间盘依次进行脱钙,用酒精予以递度脱水,常规进行石蜡包埋、切片,使用HE染色。非压迫腰椎间盘突出模型造模成功与否由光镜下椎间盘髓核组织学观察来确认;髓核对大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及神经根损伤的研究,把提取退变的髓核组织移植于假模组和实验组大鼠的 L4/5神经根背侧,大鼠非压迫性髓核突出造模完成。实验组予以丹参注射液灌胃,假模组不予丹参注射液处理。于第7、15、21天各组分期处死,分别取L4/5周围的神经根处理、切片、染色观察神经根组织形态学变化。用人TNF-α试剂盒检测各阶段肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。
　　结果:实验组神经根细胞变化明显,少数神经根细胞空泡变性,细胞水肿减轻,雪旺细胞增多,部分核仁消失。丹参注射液可改善损伤神经根的组织形态病理学改变。实验组较正常组TNF-α测定含量升高明显,说明其是腰椎间盘突出症疼痛的重要介质。实验组随治疗时间的延长而 TNF-α有所下降,差异有统计学意义(P<0.05,t=2.74)
　　结论:折尾法对SD大鼠鼠尾反复持续的牵张可造成椎间盘内组织病理学的改变。丹参注射液可减轻非压迫性腰椎间盘退变神经根损伤所导致的组织形态病理学改变,可以有效减少实验组大鼠神经根的TNF-α含量,改善或抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α),对神经根有保护作用。