蜂胶是由蜜蜂采集树脂并混入了蜂蜡和花粉以及自身的腺体分泌物所得到的一种天然产物,据文献报导,蜂胶具有广泛的生物学活性和药理作用,如抗细菌[1],抗真菌[2],抗病毒[3],抗炎症[4],抗氧化和抗肿瘤[5]等,因此蜂胶被广泛应用于食品保健品和医药卫生行业,以此用来增强人体体质以及预防疾病的发生等。
肝脏损伤是指临床上由多种有害因子造成的肝脏生理发生异常的病理现象,每年因为肝脏疾病死亡的人数在30万人以上,肝损伤主要由病毒性感染、药物或化学毒物、酗酒造成的。肝损伤后细胞内的谷丙转氨酶和谷草转氨酶向细胞外释放,细胞内的超氧化物歧化酶升高。肝损伤治疗不及时会引起慢性肝炎最终会发展为肝硬化。
乳腺癌是世界上威胁妇女生命健康的最常见的恶性肿瘤[6]。乳腺癌细胞主要有两类,一类是雌激素阳性受体细胞MCF-7和雌激素阴性受体细胞MDA-MB-231患有癌症的妇女中大约有40%是乳腺癌。现在治疗癌症的主要手段是放疗治疗,但放疗治疗的副作用危害很大,不仅杀死了癌细胞而且正常的细胞也会被杀死。蜂胶作为一种天然产物具有抗肿瘤的生物学活性,在一定浓度下可以诱导乳腺癌细胞凋亡而对正常细胞几乎没有毒性。
本实验通过在体外建立过氧化氢引起的肝损伤模型以及乳腺癌细胞体外培养,深入研究加入蜂胶后对肝细胞损伤后细胞内谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)的影响和诱导乳腺癌细胞细胞核形态、活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、抑癌基因 p53蛋白、膜联蛋白 ANXA7、核转录因子NF-κB p65蛋白的表达量的影响,为阐明蜂胶对肝损伤修复保护作用和促进乳腺癌细胞凋亡提供实验依据。
我们的研究结果如下:
1.在蜂胶对过氧化氢引起的肝损伤修复研究中,中国蜂胶和巴西蜂胶(6.25,12.5,25μg/ml)均显著提高过氧化氢损伤后肝细胞的存活率,抑制细胞的凋亡;降低了细胞培养液中ALT和AST的水平;还可以降低细胞培养液中的MDA含量,并且提高了SOD的活性。
2.在蜂胶的抗肿瘤活性研究中,中国蜂胶(25,50,100,200μg/ml)降低了乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的存活率,中国蜂胶引起癌细胞的细胞膜皱缩,细胞核碎裂,但对脐带内皮细胞HUVEC的存活率影响不大;中国蜂胶抑制了细胞迁移速率,提高细胞活性氧水平,降低了线粒体膜电位,引起乳腺癌细胞MCF-7中p53蛋白上升,MDA-MB-231中p53蛋白下调, ANXA7蛋白表达量上升,NF-κB p65蛋白的表达量下降,Casepase3的表达量上调。
总之,通过对中国蜂胶和巴西蜂胶在体外的研究,我们发现蜂胶作为一种天然产物可以有效的修复受损的肝细胞和抗肿瘤的活性,并且蜂胶在浓度为100μg/ml时对乳腺癌细胞有较强的抑制作用而对正常细胞具有很小的毒性。