乳酸菌拓扑异构酶parC基因突变与耐喹诺酮类抗菌药的相关性

本研究以内蒙古锡林郭勒牧区马奶和马奶酒中分离的15株乳酸菌为研究对象，首先，通过生理生化特性研究，发现15株试验菌株均有一定的耐盐性，可在含盐量为6.5％的环境下旺盛生长，耐热性和耐胆盐性良好，在pH4.5-9.6的环境下均可生长。其次，通过16S rRNA序列分析结合生理生化鉴定得出:4株为Enterococcusdispar（异肠球菌），2株为Enterococcus raffinosus（棉籽糖肠球菌），2株为Enterococcus gilvus，其余3株分别为Enterococcus italicus（意大利肠球菌）、Enterococcus durans（坚强肠球菌）、Enterococcus villorum。
　　通过对比3种方法对氟喹诺酮类药物的敏感性检测结果，证明纸片法和打孔法之间差异不显著，牛津杯法与纸片法、打孔法之间差异显著(P＜0.05)。3种方法标准差平均值:打孔法＜牛津杯法＜纸片法，说明纸片法试验的重复性较差、试验误差偏大，牛津杯法的误差相对较小，打孔法试验的误差最小、准确度更高。打孔法适用于乳酸菌对喹诺酮类药物的敏感性检测。
　　用打孔法、纸片法检测15株乳酸菌对氧氟沙星和诺氟沙星有不同程度的敏感性:6株为耐药菌株;8株为敏感菌株;菌株NN打孔法为耐药，纸片法为中度敏感。MIC值法检测15株乳酸菌的敏感性，结果显示:对抗菌药氧氟沙星3株为中度敏感，其余菌株为耐药;对抗菌药诺氟沙星1株为耐药敏感菌株，5株为中度敏感;其余试验菌株为耐药。
　　试验通过对敏感菌株、中度敏感菌株、耐药菌株的Ⅱ型拓扑异构酶中拓扑异构酶ⅣparC基因进行PCR扩增、测序、比对得出:耐药菌株、中度敏感菌株和敏感菌株的拓扑异构酶ⅣparC基因的在QRDR区无变化，乳酸菌对喹诺酮类药物的耐药性与菌体拓扑异构酶ⅣparC基因的突变无直接相关性。