目的:
研究富硒麦芽缓解小鼠体力疲劳的作用以及机制;富硒麦芽对尼古丁缓解小鼠体力疲劳作用的影响以及机制;富硒麦芽对小鼠的抗氧化作用;富硒麦芽对尼古丁所致小鼠氧化性损伤的拮抗作用。
方法:
选用山东大学实验动物中心提供的生长45天左右、体重为18-22克、近交封闭群的SPF级成年雄性昆明种小鼠,实验环境温度22℃±2℃,相对湿度50%±10%。根据体重均衡原则随机分为12组,依次为:①正常对照组:正常饲料+皮下注射生理盐水;②低剂量尼古丁组:正常饲料+皮下注射0.1mg/kg尼古丁;③中剂量尼古丁组:正常饲料+皮下注射0.5mg/kg尼古丁;④高剂量尼古丁组:正常饲料+皮下注射1.0mg/kg尼古丁;⑤富硒麦芽Ⅰ组:0.3mg/kg麦芽硒+皮下注射生理盐水;⑥富硒麦芽Ⅱ组:皮下注射1.0mg/kg麦芽硒+皮下注射生理盐水;⑦低尼古丁硒Ⅰ组:皮下注射0.1mg/kg尼古丁+0.3mg/kg麦芽硒;⑧低尼古丁硒Ⅱ组:皮下注射0.1mg/kg尼古丁+1.0mg/kg麦芽硒;⑨中尼古丁硒Ⅰ组:皮下注射0.5mg/kg尼古丁+0.3mg/kg麦芽硒;⑩中尼古丁硒Ⅱ组:皮下注射0.5mg/kg尼古丁+1.0mg/kg麦芽硒;(11)高尼古丁硒Ⅰ组:皮下注射1.0mg/kg尼古丁+0.3mg/kg麦芽硒;(12)高尼古丁硒Ⅱ组:皮下注射1.0mg/kg尼古丁+1.0mg/kg麦芽硒;每组24只。富硒麦芽饲料是富硒麦芽粉末与普通饲料按照所含硒的含量配制而成。每五天称一次体重,记录小鼠一般活动等情况。在每天一次给予以上试剂的第20天测试各组小鼠的负重游泳时间、血清尿素含量、肝糖原含量、血乳酸含量、血中激素(肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素)含量以及内脏组织(心脏、肝脏、肾脏、大脑、脾脏)和血液组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)活性。数据采用SPSS17.0进行统计学分析。
结果:
1.不同剂量的富硒麦芽缓解小鼠体力疲劳作用的影响以及机制
富硒麦芽Ⅰ组小鼠的尿素氮含量显著低于对照组(P<0.05),肝糖原含量显著高于对照组(P<0.01);富硒麦芽Ⅱ组小鼠的负重游泳时间和肝糖原含量均显著高于对照组(P<0.01),尿素氮含量和游泳后0min、20min血乳酸含量均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。
以上两组小鼠游泳后的肾上腺含量、多巴胺含量、5-羟色胺含量和去甲肾上腺素含量均高于对照组,但无统计学意义。
2.不同剂量的富硒麦芽对不同剂量尼古丁缓解小鼠体力疲劳作用的影响以及机制
低剂量尼古丁组的负重游泳时间显著高于对照组(P<0.05)。低尼古丁硒Ⅰ组和低尼古丁硒Ⅱ组小鼠的负重游泳时间和肝糖原含量均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),尿素氮含量和游泳后0min、20min血乳酸含量均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。以上三组小鼠游泳后的肾上腺含量、多巴胺含量、5-羟色胺含量和去甲肾上腺素含量均高于对照组,但无统计学意义。
中剂量尼古丁组、中尼古丁硒Ⅰ组和中尼古丁硒Ⅱ组小鼠的负重游泳时间和肝糖原含量均显著高于对照组(P<0.01),尿素氮含量和游泳后0min、20min血乳酸含量均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。以上三组游泳后的肾上腺含量、多巴胺含量、5-羟色胺含量和去甲肾上腺素含量均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。
高剂量尼古丁组小鼠的负重游泳时间和游泳后0min、20min血乳酸含量高于对照组,但无统计学意义;尿素氮含量高于对照组,肝糖原含量低于对照组。高尼古丁硒Ⅰ组小鼠的肝糖原含量显著高于对照组(P<0.01);负重游泳时间高于对照组,但无显著性差异;游泳后0min、20min血乳酸含量均低于对照组,但无显著性差异;尿素氮含量高于对照组。以上两组和高尼古丁硒Ⅱ组小鼠游泳后的肾上腺含量、多巴胺含量、5-羟色胺含量和去甲肾上腺素含量均高于对照组,但无统计学意义。
3.不同剂量的富硒麦芽对小鼠的抗氧化作用
富硒麦芽Ⅰ组小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑、脾脏和血清的GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性均高于对照组,但无显著性差异;MDA含量低于对照组,但无统计学意义。富硒麦芽Ⅱ组小鼠GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),MDA含量显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);脾脏MDA含量低于对照组,但无统计学意义。
4.不同剂量的富硒麦芽对不同剂量尼古丁所致小鼠氧化性损伤的影响
与对照组相比,低剂量尼古丁组小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑、脾脏和血清的某一个或几个抗氧化性指标变化有统计学意义。与低剂量的尼古丁组相比,低尼古丁硒Ⅱ组GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性均显著增高(P<0.05或P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。
中剂量尼古丁组小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑、脾脏和血清的GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);MDA含量显著高于对照组(P<0.01)。与中剂量尼古丁组相比,中尼古丁硒Ⅱ组GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性均显著增高(P<0.05或P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。
高剂量尼古丁组小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑、脾脏和血清的GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性显著低于对照组(P<0.01);MDA含量显著高于对照组(P<0.01)。高尼古丁硒Ⅰ组GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);MDA显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。与高剂量尼古丁组相比,高尼古丁硒Ⅱ组GSH-PX活性、SOD活性、T-AOC活性显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);MDA含量显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);脾脏的GSH-PX活性、SOD活性变化虽有升高,但无统计学意义。
结论:
1.经口给予小鼠的富硒麦芽和经注射给予小鼠的尼古丁酒石酸盐,对小鼠的体重、形态、活动和生长发育无不良影响。
2.富硒麦芽和适量的尼古丁都可显著增加小鼠的活动量,延长负重游泳时间,减少运动时血液中的BUN和LD含量,增加肝糖原储备,说明富硒麦芽和适量的尼古丁都具有缓解体力疲劳的作用,而且两者共同作用效果与尼古丁单独作用相比并不明显。
3.富硒麦芽使运动时小鼠的AD、DA、5-HT和NA含量增加不明显,说明其缓解体力疲劳的作用机制不是通过促进肾上腺素等激素的分泌;适量的尼古丁可显著增加运动时小鼠的AD、DA、5-HT和NA含量,说明其缓解体力疲劳的作用机制可能通过促进肾上腺素等激素的分泌;两者的缓解体力疲劳的机制不同。
4.富硒麦芽可增强小鼠体内的GSH-PX、SOD、T-AOC活性,降低MDA含量,说明富硒麦芽具有提高机体抗氧化的作用;尼古丁可降低小鼠体内的GSH-PX、SOD、T-AOC活性,增加MDA含量,说明尼古丁具有致机体氧化性损伤的作用。
5.富硒麦芽可以改善小鼠体内因尼古丁引起的GSH-PX、SOD、T-AOC活性和MDA含量的异常变化,使其趋于正常,说明富硒麦芽对尼古丁所致机体的氧化性损伤具有一定的拮抗作用。