血小板膜受体P2Y1基因C893T、P2Y12基因H1/H2多态性与脑梗死关系的研究

本博士论文研究课题《血小板膜受体P2Y1基因C893T、P2Y12基因H1/H2多态性与脑梗死关系的研究》包括2部分内容:(1)血小板膜受体PBY1基因C893T多态性与脑梗死关系的研究;(2)血小板膜受体P2Y12基因H1/H2多态性与脑梗死关系的研究。
　　第一部分 血小板膜受体P2Y1基因C893T多态性与脑梗死关系的研究
　　目的：ADP是血小板聚集的重要介质，其通过P2Y受体刺激血小板的激活和聚集。而P2Y受体基因突变可以改变这些受体活性，从而影响血小板的聚集功能。目前关于P2Y1基因多态性与脑梗死的相关研究较少，且多集中于与阿司匹林及氯吡格雷抵抗的相关研究，同时各项研究报道结果存仍在争议。本研究主要针对中国鲁北地区的汉族人群，对其血小板膜受体P2Y1基因C893T多态性与脑梗死的关系进行研究;同时采集患者的一般临床资料和部分危险因素，对遗传基因与环境因素在脑梗死中的相互作用进行研究。
　　方法：本实验主要采用病例-对照的研究方法，选择中国鲁北地区汉族人群162例健康体检者（对照组）和185例经CT或MRI证实的脑梗死患者（CI组）作为研究对象，记录两组人群的临床资料（主要包括年龄，性别，吸烟、饮酒、收缩压、舒张压、血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血尿酸、纤维蛋白原、同型半胱氨酸），采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)的分子生物学方法，检测血小板膜受体P2Y1基因C893T多态性，分析其在正常人群及脑梗死患者中的频率分布特点及与缺血性脑卒中的关系。
　　结果：病例组和对照组年龄、性别构成、饮酒、血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度会蛋白、高密度脂蛋白、尿酸、同型半胱氨酸比较差异均无统计学意义（P＞0.05），而吸烟、收缩压、舒张压、血浆纤维蛋白原水平在两组之间比较差异均具有统计学意义（P＜0.05或者P＜0.01)。病例组TC/TT型基因频率(19.46％)明显高于对照组的(8.64％)，差异有统计学意义（X2=8.195，P＜0.01)。T等位基因的频率病例组(10.81％)也明显高于对照组的(4.63％)，且差异有统计学意义（X2=9.045，P＜0.01)，多因素logistic回归分析显示，对脑梗死有影响的因素有收缩压、纤维蛋白原和893T基因携带者（P＜0.05），携带-893T等位基因者患脑梗死的危险性是非携带者的2.065倍(OR=2.065，95％CI:1.011-4.218，P=0.046)。
　　结论：及意义本研究发现吸烟、高血压及血浆纤维蛋白原水平升高是缺血性脑卒中发病的重要危险因素，同时初步证实了血小板膜糖蛋白受体P2Y1基因C893T位点TC/TT型可能是缺血性卒中的易感危险因素之一。本研究进一步明确了单核苷酸基因多态性在脑梗死的发病中起到一定作用，确认了P2Y1基因C893T多态性位点是脑梗死的遗传易感基因之一，为缺血性脑卒中的预防与治疗提供理论基础。
　　第二部分 血小板膜受体P2Y12基因H1/H2多态性与脑梗死关系的研究
　　目的：血小板在动脉粥样硬化斑块破裂后的血栓形成中起着重要的关键作用，而不同的P2Y基因型个体在血小板聚集及动脉血栓形成方面可能存在差异，而后两者是缺血性脑卒中的病理基础。本研究主要对中国鲁北地区汉族人群血小板膜受体P2Y12基因H1/H2多态性与脑梗死的关系进行研究。同时采集患者的一般临床资料和部分危险因素，对遗传基因与环境因素在脑梗死中的相互作用进行研究。
　　方法：本研究主要应用病例对照的研究方法，选择中国鲁北地区汉族人群168例健康体检者（对照组）和152例经CT或MRI证实的脑梗死患者（CI组）作为研究对象，记录两组人群的临床资料（主要包括年龄，性别，吸烟、饮酒、收缩压、舒张压、血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血尿酸、纤维蛋白原、同型半胱氨酸），采用聚合酶链反应限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)的分子生物学方法，检测血小板膜受体P2Y12基因G52T多态性，分析其在正常人群及脑梗死患者中的频率分布特点及与缺血性脑卒中的关系。
　　结果：病例组和对照组之间年龄、性别构成、吸烟、饮酒、血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度会蛋白、高密度脂蛋白、尿酸、同型半胱氨酸比较差异均无统计学意义（P＞0.05），病例组和对照组间收缩压、舒张压、纤维蛋白原比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。病例组H1/H2H和H2/H2型基因频率(26.3％)明显高于对照组的(16.7％)，差异有统计学意义(X2=4.440，P＜0.05)。H2等位基因的频率病例组(14.5％)也明显高于对照组的(8.6％)，且差异有统计学意义（X2=5.392，P＜0.05），多因素logistic回归分析显示，对脑梗死有影响的因素有收缩压、纤维蛋白原和H2基因携带者（P＜0.05），携带H2等位基因者患脑梗死的危险性是非携带者的1.928倍(OR=1.928，95％ CI:1.137-3.188，P=0.038)。
　　结论：本研究发现高血压和血浆纤维蛋白原水平升高是缺血性脑卒中发病的重要危险因素，同时初步证实了血小板膜糖蛋白受体P2Y12基因H1/H2多态性可能是缺血性卒中的易感危险因素之一，为IS的防治提供理论基础。