瘦素及其受体OB-Rb、OB-Re在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中作用的研究

目的：采用高脂饮食喂养方法制备大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型，逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)测定大鼠肝组织中OB-Rb、OB-RemRNA的表达情况，并检测血清瘦素水平及其它各项生化指标、肝组织病理变化情况，行统计学分析以探讨瘦素及其受体OB-Rb、OB-Re在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用。 方法：选用健康雄性Wistar大鼠40只，体重195±15g。正常饲养1周后，将大鼠随机分为正常对照组和高脂饮食诱导脂肪肝模型组，每组20只，正常对照组给予标准饲料喂养；高脂饮食组给予高脂饲料，即在标准饲料基础上添加2％胆固醇和10％猪油。喂养20周后将全部大鼠宰杀，留取标本用于以下项目检测：用日本OlympusAU2700全自动生化分析仪测定空腹血糖(FBG)、血清甘油三酯(TG)；比色法测定血清游离脂肪酸(FFA)；用放射免疫法测定空腹血清胰岛素(FINS)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，按照HOMA模型计算空腹状态下胰岛素抵抗指数IRI=(FINS×FBF)/22.5；用ELISA法测定血清瘦素(LP)浓度；苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织普通病理变化，SudanⅣ染色观察肝细胞的脂肪变性程度，Masson三重染色观察肝脏纤维化程度，并采用多功能病理图像分析仪(北京航空航天大学研制)测定脂变和胶原纤维面积百分比；采用RT-PCR方法测定肝脏组织中OB-Rb、OB-RemRNA表达情况。 使用SPSS12.0统计软件处理实验数据，所有数据以(-x)±s表示，两样本均数比较采用t检验，若P＜0.05，则认为两组数据差异有显著性。直线相关法用于相关分析。 结论： 1.高脂饮食可以成功制备NASH大鼠模型，脂代谢、糖代谢、各种细胞因子等的代谢紊乱是NASH形成的重要机制。 2.模型组大鼠血清瘦素浓度显著高于对照组，表明NASH发病机制中有高瘦素血症参与。且血清瘦素浓度与肝脏中OB-Rb、OB-RemRNA的表达量有相关性，提示血清瘦素水平增高可能参与调节瘦素受体的变化，是瘦素抵抗的机制之一。 3.模型组大鼠肝组织OB-RbmRNA表达较对照组明显减弱。影响了瘦素生理作用的发挥，是瘦素抵抗的重要机制之一；瘦素功能性受体的表达减弱与肝组织脂变、炎症活动度评分呈负相关，可反映肝脏受损的程度。 4.模型组大鼠肝组织OB-RemRNA表达较对照组明显减弱，可能是瘦素抵抗的机制之一。