柴胡人参药对干预非酒精性脂肪肝细胞模型法尼醇X受体调控通路的机制研究

目的:通过建立NAFLD细胞模型，观察柴胡人参药对对NAFLD体外模型肝细胞内TC、TG及FXR介导的脂质代谢调控通路中各蛋白表达及mRNA水平的影响，阐明柴胡人参药对对NAFLD肝细胞脂代谢的分子调控机制。
　　方法:SD大鼠20只随机分成4组，即C组:正常组，M组:模型组，P组:吡格列酮用药组，Y组:柴胡人参药对用药组，每组5只。C组和M组分别以0.9％生理盐水灌胃，其余各组灌服中药药液和吡格列酮溶解药液，2次/天，连续灌胃3天，杀鼠得血清，灭活除菌后，-80℃保存。通过CCK-8试剂盒检测各组大鼠含药血清毒性。对造模细胞进行油红O染色及TG含量检测，确定每组大鼠含药血清最佳效应浓度。以最佳效应浓度的含药血清干预造模细胞后，检测细胞内TC、TG和油红O染色判断细胞内脂质蓄积情况;Western Blot检测FXR调控通路中各蛋白表达情况;实时定量PCR检测FXR调控通路中各分子mRNA水平变化。
　　结果:
　　1.1mmol/L混合脂肪酸可使脂肪变细胞着色明显，其平均光密度显著高于0.5mmol/L浓度组;1mmol/L浓度组TG含量显著高于0.5mmol/L浓度组。每组含药血清IC50浓度分别为:正常大鼠血清组（Zq组）:44.27％，柴胡人参药对组（Y组）:32.34％，吡格列酮组（P组）:36.00％;IC10浓度分别为:Zq组:10.26％，Y组:10.84％，P组:11.49％。10％浓度的含药血清均能够较显著的减少细胞内脂滴蓄积，显著降低细胞内TG含量。
　　2.Y组和P组均能显著减少细胞内脂滴蓄积，降低细胞内TG含量。柴胡人参药对能够上调FXR、SHP蛋白表达，使LXR、SREBP-1c、FAS蛋白表达显著降低;同时药对能够使FXR和SHP mRNA水平上升，间接下调LXR、SREBP-1c、FAS mRNA水平，从而改善HepG2细胞脂肪变。
　　结论:柴胡人参药对能够改善HepG2细胞内脂滴蓄积，通过调节FXR介导的脂质调控通路中各蛋白的表达，降低脂肪变HepG2细胞内TG含量，这或许是治疗NAFLD的机制之一。